在细胞生物学、肝脏疾病机制研究等领域，高质量的小鼠肝脏单细胞悬液是开展后续流式分析、单细胞测序、细胞功能实验的核心前提。传统手动制备方法常面临诸多难题：消化酶作用不均导致细胞解离不彻底，反复操作中细胞活性易受温度影响下降，且人工研磨、过滤步骤繁琐，难以保证批次间的一致性。这些问题不仅拖慢实验进度，还可能因样本质量不稳定影响后续检测数据的可靠性。而上海净信单细胞悬液制备仪凭借标准化程序控制、精准温控及自动化操作，为小鼠肝脏单细胞悬液制备提供了稳定高效的解决方案，有效规避传统方法的痛点。

实验目的：小鼠肝脏制备成单细胞悬液，为后续流式细胞分析、单细胞测序、细胞功能检测等实验提供高活性、高纯度的单细胞样本，保障实验数据的准确性与重复性。

实验选用仪器：

单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK-B

实验步骤：

1、连接仪器电源，打开开关，选好肝脏程序以备用。

2、消化酶和终止液提前用流动自来水解冻，让其混合更加均匀。

3、小鼠断颈处死后，取出肝脏部，放入有PBS的培养皿中，放在冰上。

将选取的肝脏组织用PBS洗涤后，用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中，加入1ml左右消化酶。

5、放到?？樯希≡穸杂Τ绦?，点击运行开始。

6、时间结束后仪器自动停止。

7、用70um滤网过滤，加入终止液终止消化(消化液：终止液=1：1)

过滤后的悬液放到离心机上重悬、重悬后弃掉上清，加入2ml裂红溶液(200ulFBS)，冰上裂红(3-5分钟)，然后加入500ulPBS+1ml碎片去除剂，离心后弃上清，然后洗细胞两次。

最后加入少量无菌PBS打散混匀底部沉淀细胞，即可得到单细胞悬液。

9、OAPI进行染色，细胞计数仪看结果。

细胞计数仪结果图

注意事项：

1、单细胞试剂盒要在-20℃低温保存，使用时提前拿出来用凉水解冻，切记用温热水。

2、注意不要清洗单细胞悬液次数或时间太长，导致细胞损失。

3、上海净信单细胞悬液制备仪让肝脏样本处理更省心

从本次小鼠肝脏单细胞悬液制备实验来看，上海净信单细胞悬液制备仪的优势尤为突出。相比传统手动操作，仪器预设的肝脏专属程序省去了反复调试参数的麻烦，操作人员只需按步骤放置样本、启动程序，即可实现消化酶的精准作用 —— 避免了人工控制消化时间、温度导致的解离过度或不彻底问题。实验中，从组织剪碎到仪器自动停止消化仅需常规步骤时长，且全程无需频繁转移样本，最大程度减少了细胞在室温下暴露的时间，为后续裂红、清洗步骤保留了更多活细胞。

后续细胞计数仪结果也印证了仪器的可靠性：制备的单细胞悬液活率稳定，细胞分散均匀，无明显组织碎片残留，完全满足 OAPI 染色及后续实验的要求。尤其值得一提的是，仪器操作门槛低，即使是刚接触样本制备的实验人员，按照流程也能快速上手，有效降低了因操作经验差异导致的实验误差。

对于需要频繁开展小鼠肝脏相关研究的实验室来说，上海净信单细胞悬液制备仪不仅是提升实验效率的 “好帮手”，更是保障样本质量稳定性的 “定心丸”。它解决了传统方法中 “耗时、费力、结果不稳定” 的核心痛点，让科研人员能将更多精力投入到后续的数据分析与机制探索中，为肝脏领域的研究提供了坚实的样本制备支持。