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2025/8/20 11:15:22
香猪多器官单细胞制备攻略:肝脏、卵巢、子宫、胰腺单细胞悬液制备实验方案
来源:上海净信

单细胞测序技术的核心在于高质量单细胞悬液的制备,而香猪肝脏、卵巢、子宫、胰腺等器官因组织特性差异,传统手动处理易导致细胞活性低、杂质多。借助单细胞悬液制备仪的标准化程序,可实现多器官组织的高效解离,为后续单细胞分析提供稳定的样本基础 —— 这份实验方案将详解如何用仪器精准完成香猪多器官单细胞悬液制备。

实验用仪器:

单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-12WK

实验目的:香猪-肝脏、卵巢、子宫、胰腺制备成单细胞悬液

实验步骤:

1、连接仪器电源,打开开关,选好程序以备用。

2、消化酶和终止液提前用流动自来水解冻,让其混合更加均匀。

3、香猪解剖后,取出肝脏、卵巢、子宫、胰腺放入有类器官缓冲液的培养皿中,放在冰上。

4、将选取的组织用类器官缓冲液洗涤后,用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中,加入1ml左右消化酶。(所有工具灭菌处理)

5、放到??樯希≡穸杂Τ绦?,点击运行开始。

6、时间结束后仪器自动停止。

7、吸出消化好的悬液,立即镜检。

8、终止后,过滤单细胞悬液,离心弃上清,用基质胶重悬,进行后续培养。

注意事项:

1、单细胞试剂盒要在-20℃低温保存,使用时提前拿出来用凉水解冻,切记用温热水。

2、注意不要清洗单细胞悬液次数或时间太长,导致细胞损失。

实验效果:

左图为:肝脏,右图为:胰腺

左图为:卵巢 ,右图为: 子宫

左图为:子宫 ,右图为:子宫

通过单细胞悬液制备仪的程序化操作,香猪肝脏、卵巢、子宫、胰腺组织能快速转化为高活性单细胞悬液,既减少了手动操作的误差,又通过标准化流程保障了不同器官样本的一致性。遵循本方案,可高效获得符合单细胞测序要求的悬液,为解析香猪多器官细胞异质性研究提供可靠的实验基础,让单细胞制备从 “经验依赖” 走向 “仪器标准化”。